一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉素基因中有识别位点的EcoRI消化。消化物与酵母 DNA 连接后转化对两种抗生素都敏感的 E.coli 菌株。 （1）利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞？ （2）怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆？
在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind Ⅲ切割果蝇基因组 DNA，以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15．1（用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照），旁边标出了片段的大小。 如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交，预测上述电泳图会出现什么样的杂交带？
用限制性内切酶将某种生物的DNA切成不同片段，并把所有片段随机地分别连接到用同样内切酶切过的基因载体上，然后分别转移到适当受体细胞中，如细菌。通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系或克隆。如果所制备的克隆数目已多到可把某种生物的全部基因都包含在内时，这一组克隆就成为该种生物的（）
就克隆一个基因（DNA 片段）来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：（）、（）、（）。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
取代型载体（replacement vector）是指同一种限制性内切核酸酶在），DNA 中具有两个切点，外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。将重组DNA导入大肠埃希菌最常用方法是（）
在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，需使用（）
一旦克隆了一个遗传定位的基因，就可以用（）技术来鉴定基因组 DNA 文库中与之相邻的基因克隆。
基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。
pBR322质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（）
用超声波处理烟草基因组DNA后，用下列哪一个工程酶处理可以获得平末端片段，用于后续克隆：（）
现在最常用的 pUC 载体是 pUCl8，它的分子量小，具有多克隆位点和易于选择的分子标记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链 DNA。
重组DNA技术大致可以用以下几个字简单概括：分（目的基因的分离）、切（限制性内切酶切割目的基因和载体）、接（目的基因和载体连接）、转（连接产物导入受体细胞）、筛（筛选阳性重组子）。重组DNA技术中最常用的筛选方法是（）
能够用来克隆 32kb 以下大小的外源片段的质粒载体是（）。
可用于克隆基因载体的DNA有（）。
载体是能携带目的基因进入宿主细胞，实现外源DNA的无性繁殖，或表达有意义的蛋白质的一类DNA分子，是重组DNA技术中一个重要的工具。人工构建的含有噬菌体DNAcos序列和质粒载体复制子序列的特殊类型的载体称为（）
构建基因文库一般使用的载体是（）I质粒；IIλ-DNA；IIICosmid
PUC质粒作为基因克隆载体应有下列何种调控元件（）
可用作克隆基因载体的 DNA 有
3、将目标性状位点精确定位在分子标记连锁图谱上，利用与性状位点紧密连锁的分子标记筛选大片段的DNA文库，构建含目的基因区域的精细物理图谱，采用染色体步行法逼近目的基因，获得含目的基因的大片段克隆，采用亚克隆分析或探针筛选cDNA文库，将目的基因确定于较小片段上，最后对目的基因进行克隆以及功能鉴定从而获得目的基因的方法称为（）。
外源基因必须插入到克隆载体或表达载体中，形成具有自主复制起点的“重组DNA分子”后才能导入宿主细胞。
构建基因文库一般使用的载体是（)I质粒;IIλ£DNA;IIICosmid
21、下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是（）。
【简答题】手绘双酶切质粒结果（载体长度为2690bp，目的片段长度为750bp，第1个泳道为DL 2000 marker,6条带2000,1000,750,500,250,100；第2个泳道是空载体酶切后产物，第3个泳道为阳性克隆酶切后产物（载体+目的基因），第4个泳道是DL15000 marker，7条带15000,10000,7500,5000,2500,1000,250）。
